एचपीएलसी विफलताओं और समाधानों का सबसे अधिक खतरा

एक उच्च परिशुद्धता उपकरण के रूप में, यदि उपयोग के दौरान इसे सही तरीके से संचालित नहीं किया जाता है, तो एचपीएलसी आसानी से कुछ परेशानी वाली छोटी समस्याएं पैदा कर सकता है।सबसे आम समस्याओं में से एक स्तंभ संपीड़न समस्या है।दोषपूर्ण क्रोमैटोग्राफ का त्वरित निवारण कैसे करें।एचपीएलसी प्रणाली में मुख्य रूप से एक जलाशय बोतल, एक पंप, एक इंजेक्टर, एक कॉलम, एक कॉलम तापमान कक्ष, एक डिटेक्टर और एक डेटा प्रोसेसिंग सिस्टम शामिल है।पूरे सिस्टम के लिए, खंभे, पंप और डिटेक्टर प्रमुख घटक और मुख्य स्थान हैं जो समस्याओं से ग्रस्त हैं।

स्तंभ दबाव की कुंजी वह क्षेत्र है जिस पर एचपीएलसी का उपयोग करते समय ध्यान देने की आवश्यकता है।स्तंभ दबाव की स्थिरता क्रोमैटोग्राफ़िक शिखर आकार, स्तंभ दक्षता, पृथक्करण दक्षता और अवधारण समय से निकटता से संबंधित है।कॉलम दबाव स्थिरता का मतलब यह नहीं है कि दबाव मान एक स्थिर मूल्य पर स्थिर है, बल्कि यह है कि दबाव में उतार-चढ़ाव की सीमा 345kPa या 50PSI के बीच है (जब कॉलम दबाव स्थिर होता है और धीरे-धीरे बदल रहा होता है तो ग्रेडिएंट रेफरेंस के उपयोग की अनुमति होती है)।बहुत अधिक या बहुत कम दबाव एक स्तंभ दबाव समस्या है।

एचपीएलसी विफलताओं और समाधानों का सबसे अधिक खतरा

1, एचपीएलसी के उपयोग में उच्च दबाव सबसे आम समस्या है।इसका मतलब है दबाव में अचानक वृद्धि.सामान्य तौर पर, निम्नलिखित कारण हैं: (1) सामान्य तौर पर, यह प्रवाह चैनल रुकावट के कारण होता है।इस बिंदु पर, हमें इसकी टुकड़े-टुकड़े करके जांच करनी चाहिए।एक।सबसे पहले, वैक्यूम पंप के इनलेट को काट दें।इस बिंदु पर, PEEK ट्यूब को तरल से भर दिया गया था ताकि PEEK ट्यूब विलायक की बोतल से छोटी हो, यह देखने के लिए कि क्या तरल इच्छानुसार टपक रहा है।यदि तरल नहीं टपक रहा है या धीरे-धीरे टपक रहा है, तो विलायक फिल्टर हेड अवरुद्ध है।उपचार: आधे घंटे के लिए 30% नाइट्रिक एसिड में भिगोएँ और अल्ट्राप्योर पानी से धो लें।यदि तरल बेतरतीब ढंग से टपकता है, तो विलायक फ़िल्टर हेड सामान्य है और उसकी जाँच की जा रही है;बी।पर्ज वाल्व खोलें ताकि मोबाइल चरण कॉलम से न गुजरे, और यदि दबाव काफी कम नहीं हुआ है, तो फिल्टर व्हाइट हेड अवरुद्ध हो गया है।उपचार: फ़िल्टर किए गए व्हाइटहेड्स को हटा दिया गया और आधे घंटे के लिए 10% आइसोप्रोपेनॉल के साथ सोनिकेट किया गया।यह मानते हुए कि दबाव 100पीएसआई से नीचे चला जाता है, फ़िल्टर किया गया सफेद सिर सामान्य है और इसकी जाँच की जा रही है;सी।कॉलम के निकास सिरे को हटा दें, यदि दबाव कम नहीं होता है, तो कॉलम अवरुद्ध हो जाता है।उपचार: यदि यह बफर नमक अवरोध है, तो दबाव सामान्य होने तक 95% कुल्ला करें।यदि रुकावट कुछ अधिक संरक्षित सामग्री के कारण होती है, तो सामान्य दबाव की ओर बढ़ने के लिए वर्तमान मोबाइल चरण की तुलना में अधिक मजबूत प्रवाह का उपयोग किया जाना चाहिए।यदि उपरोक्त विधि के अनुसार दीर्घकालिक सफाई का दबाव कम नहीं होता है, तो कॉलम के इनलेट और आउटलेट को इसके विपरीत उपकरण से जुड़ा हुआ माना जा सकता है, और कॉलम को मोबाइल चरण से साफ किया जा सकता है।इस समय, यदि स्तंभ का दबाव अभी भी कम नहीं हुआ है, तो स्तंभ प्रवेश छलनी प्लेट को केवल बदला जा सकता है, लेकिन एक बार ऑपरेशन अच्छा नहीं होने पर, स्तंभ प्रभाव को कम करना आसान होता है, इसलिए कम उपयोग करने का प्रयास करें।कठिन समस्याओं के लिए, कॉलम प्रतिस्थापन पर विचार किया जा सकता है।

(2) गलत प्रवाह दर सेटिंग: सही प्रवाह दर को रीसेट किया जा सकता है।

(3) गलत प्रवाह अनुपात: प्रवाह के विभिन्न अनुपातों का चिपचिपापन सूचकांक अलग-अलग होता है, और उच्च चिपचिपाहट वाले प्रवाह का संबंधित सिस्टम दबाव भी बड़ा होता है।यदि संभव हो, तो कम चिपचिपाहट वाले सॉल्वैंट्स को बदला जा सकता है या फिर से सेट करके तैयार किया जा सकता है।

(4) सिस्टम दबाव शून्य बहाव: तरल स्तर सेंसर के शून्य को समायोजित करें।

2, दबाव बहुत कम है (1) आमतौर पर सिस्टम रिसाव के कारण होता है।क्या करें: प्रत्येक कनेक्शन, विशेष रूप से कॉलम के दोनों सिरों पर इंटरफ़ेस ढूंढें, और रिसाव क्षेत्र को कस लें।पोस्ट हटाएं और पीटीएफई फिल्म को उचित बल से कसें या लाइन करें।

(2) गैस पंप में प्रवेश करती है, लेकिन इस समय दबाव आमतौर पर अस्थिर, उच्च और निम्न होता है।अधिक गंभीरता से, पंप द्रव को अवशोषित करने में सक्षम नहीं होगा।उपचार विधि: सफाई वाल्व खोलें और 3~5मिली/मिनट की प्रवाह दर पर साफ करें।यदि नहीं, तो एक समर्पित सुई ट्यूब का उपयोग करके निकास वाल्व पर हवा के बुलबुले खींचे गए।

(3) कोई मोबाइल चरण बहिर्वाह नहीं: जांचें कि क्या जलाशय की बोतल में एक मोबाइल चरण है, क्या सिंक मोबाइल चरण में डूबा हुआ है, और क्या पंप चल रहा है।

(4) संदर्भ वाल्व बंद नहीं है: संदर्भ वाल्व मंदी के बाद बंद है।यह आमतौर पर 0.1 तक नीचे चला जाता है।संदर्भ वाल्व बंद करने के बाद ~ 0.2 एमएल/मिनट।

सारांश:

इस पेपर में, तरल क्रोमैटोग्राफी में केवल सामान्य समस्याओं का विश्लेषण किया गया है।बेशक, हमारे व्यावहारिक अनुप्रयोग में, हमें और भी अन्य समस्याओं का सामना करना पड़ेगा।दोष प्रबंधन में, हमें निम्नलिखित सिद्धांतों का पालन करना चाहिए: काल्पनिक कारक और समस्या के बीच संबंध निर्धारित करने के लिए एक समय में केवल एक कारक बदलें;आम तौर पर, समस्या निवारण के लिए भागों को बदलते समय, हमें बर्बादी को रोकने के लिए विघटित भागों को वापस उनकी जगह पर रखने पर ध्यान देना चाहिए;एक अच्छी रिकॉर्ड आदत बनाना दोष प्रबंधन की सफलता की कुंजी है।निष्कर्ष में, एचपीएलसी का उपयोग करते समय, नमूना पूर्व-उपचार और उपकरण के उचित संचालन और रखरखाव पर ध्यान देना महत्वपूर्ण है।