पुनः संयोजक प्रोटीन एंटीजन में अक्सर कई अलग -अलग एपिटोप होते हैं, जिनमें से कुछ अनुक्रम एपिटोप्स होते हैं और कुछ संरचनात्मक एपिटोप होते हैं। डाइजेस्टर्ड एंटीजन के साथ जानवरों को टीकाकरण करके प्राप्त पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी व्यक्तिगत एपिटोप्स के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के मिश्रण हैं और इसका उपयोग सामान्य रूप से प्राकृतिक संरचनाओं या विकृत लक्ष्य प्रोटीन का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। इम्युनोजेन के रूप में विकृत प्रोटीन का उपयोग करने का एक साइड लाभ यह है कि विकृत प्रोटीन अधिक इम्युनोजेनिक होते हैं और जानवरों में एक मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को उत्तेजित कर सकते हैं।
एस्चेरिचिया कोलाई की अभिव्यक्ति प्रणाली आमतौर पर एंटीजेनिक उद्देश्यों के लिए चुनी जाती है क्योंकि यह समय और धन के मामले में सबसे महंगी प्रणाली है। लक्ष्य प्रोटीन अभिव्यक्ति और शुद्धि की सुविधा की संभावना में सुधार करने के लिए, कभी -कभी लक्ष्य प्रोटीन का केवल एक छोटा सा टुकड़ा, जैसे कि एक विशिष्ट डोमेन, व्यक्त किया जाता है।
प्रोटीन की त्रि-आयामी संरचना
एक प्रोटीन का विशिष्ट डोमेन
यदि एंटीबॉडी की तैयारी का उद्देश्य पूरी तरह से डब्ल्यूबी डिटेक्शन के लिए है, तो सिंथेटिक छोटे पेप्टाइड का एंटीजन के रूप में उपयोग करना किफायती और तेजी से है, लेकिन पेप्टाइड सेगमेंट के अनुचित चयन के कारण कमजोर इम्युनोजेनेसिटी या गैर-पुनर्जन्म का खतरा है। चूंकि एंटीबॉडी की तैयारी के लिए एक लंबी अवधि की आवश्यकता होती है, इसलिए प्रयोग की सफलता दर सुनिश्चित करने के लिए पॉलीपेप्टाइड एंटीजन का उपयोग करके एंटीबॉडी तैयार करने के लिए दो या तीन अलग -अलग पेप्टाइड खंडों को अक्सर चुना जाता है।
टीकाकरण के लिए पॉलीपेप्टाइड एंटीजन की शुद्धता 80%से अधिक होना आवश्यक है। यद्यपि एक उच्च शुद्धता सैद्धांतिक रूप से बेहतर विशिष्टता के साथ एंटीबॉडी प्राप्त कर सकती है, व्यवहार में, जानवर हमेशा बड़ी संख्या में गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं, इस प्रकार एंटीजन शुद्धता के लाभों को मास्क करते हैं।
इसके अलावा, छोटे पेप्टाइड्स से एंटीबॉडी की तैयारी को इसकी इम्युनोजेनेसिटी को बढ़ाने के लिए उपयुक्त वाहक एंटीजन के लिए क्रॉस-लिंक किया जाना चाहिए। दो सामान्य एंटीजेनिक वाहक केएलएच और बीएसए हैं।
पोस्ट टाइम: 2025-07-03