पुनः संयोजक प्रोटीन एंटीजन में अक्सर कई अलग-अलग एपिटोप होते हैं, जिनमें से कुछ अनुक्रम एपिटोप होते हैं और कुछ संरचनात्मक एपिटोप होते हैं।विकृत एंटीजन के साथ जानवरों को प्रतिरक्षित करके प्राप्त पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी व्यक्तिगत एपिटोप्स के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का मिश्रण होते हैं और सामान्य रूप से प्राकृतिक संरचनाओं या विकृत लक्ष्य प्रोटीन का पता लगाने के लिए उपयोग किया जा सकता है।विकृत प्रोटीन को इम्युनोजेन के रूप में उपयोग करने का एक अतिरिक्त लाभ यह है कि विकृत प्रोटीन अधिक इम्युनोजेनिक होते हैं और जानवरों में एक मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को उत्तेजित कर सकते हैं।
एस्चेरिचिया कोली की अभिव्यक्ति प्रणाली को आमतौर पर एंटीजेनिक उद्देश्यों के लिए चुना जाता है क्योंकि यह समय और धन के मामले में सबसे महंगी प्रणाली है।लक्ष्य प्रोटीन अभिव्यक्ति की संभावना और शुद्धिकरण की सुविधा में सुधार के लिए, कभी-कभी लक्ष्य प्रोटीन का केवल एक छोटा सा टुकड़ा, जैसे कि एक विशिष्ट डोमेन, व्यक्त किया जाता है।
प्रोटीन की त्रि-आयामी संरचना
प्रोटीन का विशिष्ट डोमेन
यदि एंटीबॉडी तैयार करने का उद्देश्य केवल डब्ल्यूबी का पता लगाने के लिए है, तो एंटीजन के रूप में सिंथेटिक छोटे पेप्टाइड का उपयोग करना किफायती और तेज़ है, लेकिन पेप्टाइड सेगमेंट के अनुचित चयन के कारण कमजोर इम्यूनोजेनेसिटी या गैर-पुनर्जागरण का खतरा है।चूंकि एंटीबॉडी तैयार करने के लिए लंबी अवधि की आवश्यकता होती है, प्रयोग की सफलता दर सुनिश्चित करने के लिए पॉलीपेप्टाइड एंटीजन का उपयोग करके एंटीबॉडी तैयार करने के लिए अक्सर दो या तीन अलग-अलग पेप्टाइड खंडों का चयन किया जाता है।
टीकाकरण के लिए पॉलीपेप्टाइड एंटीजन की शुद्धता 80% से अधिक होनी आवश्यक है।यद्यपि उच्च शुद्धता सैद्धांतिक रूप से बेहतर विशिष्टता के साथ एंटीबॉडी प्राप्त कर सकती है, व्यवहार में, जानवर हमेशा बड़ी संख्या में गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं, इस प्रकार एंटीजन शुद्धता के लाभों को छुपाते हैं।
इसके अलावा, छोटे पेप्टाइड्स से एंटीबॉडी की तैयारी को इसकी इम्युनोजेनेसिटी बढ़ाने के लिए उपयुक्त वाहक एंटीजन से क्रॉस-लिंक किया जाना चाहिए।दो सामान्य एंटीजेनिक वाहक केएलएच और बीएसए हैं।
पोस्ट समय: मार्च-23-2023