जैविक अनुसंधान में, आमतौर पर लंबे अनुक्रम वाले पॉलीपेप्टाइड्स का उपयोग किया जाता है।अनुक्रम में 60 से अधिक अमीनो एसिड वाले पेप्टाइड्स के लिए, जीन अभिव्यक्ति और एसडीएस-पेज का उपयोग आम तौर पर उन्हें प्राप्त करने के लिए किया जाता है।हालाँकि, इस विधि में लंबा समय लगता है और अंतिम उत्पाद पृथक्करण प्रभाव अच्छा नहीं होता है।
लंबे पेप्टाइड संश्लेषण के लिए चुनौतियाँ और समाधान
लंबे पेप्टाइड्स के संश्लेषण में, हमें हमेशा एक समस्या का सामना करना पड़ता है, यानी, संश्लेषण में अनुक्रम की वृद्धि के साथ संक्षेपण प्रतिक्रिया की स्थैतिक बाधा बढ़ जाती है, और प्रतिक्रिया को पूरा करने के लिए प्रतिक्रिया समय को समायोजित करने की आवश्यकता होती है।हालाँकि, प्रतिक्रिया समय जितना लंबा होगा, उतने अधिक दुष्प्रभाव उत्पन्न होंगे, और लक्ष्य पेप्टाइड का एक हिस्सा बनेगा।ऐसे अवशेष - अपर्याप्त पेप्टाइड श्रृंखलाएं लंबे पेप्टाइड संश्लेषण में उत्पन्न होने वाली प्रमुख अशुद्धियाँ हैं।इसलिए, लंबे पेप्टाइड के संश्लेषण में, जिस मुख्य समस्या को हमें दूर करना है वह उच्च गुणवत्ता वाली प्रतिक्रिया स्थितियों और प्रतिक्रिया विधियों का पता लगाना है, ताकि अमीनो एसिड संक्षेपण प्रतिक्रिया को अधिक व्यापक और पूर्ण बनाया जा सके।इसके अलावा, प्रतिक्रिया समय को कम करें, क्योंकि प्रतिक्रिया समय जितना लंबा होगा, उतनी अधिक अनियंत्रित साइड प्रतिक्रियाएं होंगी, उप-उत्पाद उतने ही अधिक जटिल होंगे।इसलिए, निम्नलिखित तीन बिंदुओं का सारांश दिया गया है:
माइक्रोवेव संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है: संश्लेषण प्रक्रिया में आने वाले कुछ अमीनो एसिड के लिए जिन्हें एकीकृत करना आसान नहीं है, माइक्रोवेव संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है।इस विधि के उल्लेखनीय परिणाम हैं, और यह प्रतिक्रिया समय को बहुत कम कर देता है, और दो प्रमुख उप-उत्पादों के निर्माण को कम कर देता है।
खण्ड संश्लेषण विधि का प्रयोग किया जा सकता है: जब कुछ पेप्टाइड्स को सामान्य संश्लेषण विधियों द्वारा संश्लेषित करना मुश्किल होता है और शुद्ध करना आसान नहीं होता है, तो हम पेप्टाइड के एक निश्चित खंड में कई अमीनो एसिड के संपूर्ण संघनन को पेप्टाइड श्रृंखला में समग्र रूप से अपना सकते हैं।यह विधि संश्लेषण की कई समस्याओं का समाधान भी कर सकती है।
एसाइलहाइड्राज़ाइड संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है: पेप्टाइड्स का एसाइलहाइड्राजाइड संश्लेषण पेप्टाइड बॉन्डिंग विधि को प्राप्त करने के लिए एमाइड बॉन्ड के गठन के बीच एन-टर्मिनल सीआईएस पेप्टाइड और सी-टर्मिनल पॉलीपेप्टाइड हाइड्राजाइड रासायनिक चयनात्मक प्रतिक्रिया के ठोस चरण संश्लेषण की एक विधि है।पेप्टाइड श्रृंखला में Cys की स्थिति के आधार पर, यह विधि संपूर्ण पेप्टाइड श्रृंखला को कई अनुक्रमों में विभाजित करती है और उन्हें क्रमशः संश्लेषित करती है।अंत में, लक्ष्य पेप्टाइड तरल-चरण संक्षेपण प्रतिक्रिया के माध्यम से प्राप्त किया जाता है।यह विधि न केवल लंबे पेप्टाइड के संश्लेषण समय को काफी कम कर देती है, बल्कि अंतिम उत्पाद की शुद्धता को भी काफी बढ़ा देती है।
लंबी पेप्टाइड शुद्धि
लंबे पेप्टाइड्स की विशिष्टता अनिवार्य रूप से कच्चे पेप्टाइड्स के जटिल घटकों की ओर ले जाती है।इसलिए, एचपीएलसी द्वारा लंबे पेप्टाइड्स को शुद्ध करना भी एक चुनौती है।पॉलीपेप्टाइड शुद्धिकरण प्रक्रिया की अमाइलॉइड श्रृंखला, बहुत सारे अनुभव को अवशोषित करती है और लंबे पेप्टाइड के शुद्धिकरण में सफलतापूर्वक उपयोग की जाती है।नए उपकरणों को अपनाने, कई शुद्धिकरण प्रणालियों के मिश्रण, बार-बार पृथक्करण और अन्य अनुभव विधियों से, लंबी पेप्टाइड शुद्धि की सफलता दर में काफी सुधार हुआ था।
पोस्ट करने का समय: अप्रैल-18-2023