समस्याओं और लंबे पेप्टाइड संश्लेषण की समाधान

जैविक अनुसंधान में, एक लंबे अनुक्रम के साथ पॉलीपेप्टाइड्स का उपयोग आमतौर पर किया जाता है। अनुक्रम में 60 से अधिक अमीनो एसिड वाले पेप्टाइड्स के लिए, जीन अभिव्यक्ति और एसडीएस-पेज का उपयोग आम तौर पर उन्हें प्राप्त करने के लिए किया जाता है। हालांकि, इस विधि में लंबा समय लगता है और अंतिम उत्पाद पृथक्करण प्रभाव अच्छा नहीं है।

लंबी पेप्टाइड संश्लेषण के लिए चुनौतियां और समाधान

लंबे पेप्टाइड्स के संश्लेषण में, हमें हमेशा एक समस्या का सामना करना पड़ता है, अर्थात्, संश्लेषण में अनुक्रम की वृद्धि के साथ संक्षेपण प्रतिक्रिया का स्टेरिक बाधा बढ़ जाती है, और प्रतिक्रिया को पूर्ण बनाने के लिए प्रतिक्रिया समय को समायोजित करने की आवश्यकता होती है। हालांकि, प्रतिक्रिया समय जितना लंबा होता है, अधिक दुष्प्रभाव उत्पन्न होते हैं, और लक्ष्य पेप्टाइड का एक हिस्सा बनता है। इस तरह के अवशेष - कमी पेप्टाइड चेन लंबे पेप्टाइड संश्लेषण में उत्पादित महत्वपूर्ण अशुद्धियां हैं। इसलिए, लंबे पेप्टाइड के संश्लेषण में, हमें जिस प्रमुख समस्या को दूर करना चाहिए, वह उच्च गुणवत्ता वाली प्रतिक्रिया की स्थिति और प्रतिक्रिया विधियों का पता लगाने के लिए है, ताकि अमीनो एसिड संघनन प्रतिक्रिया को अधिक व्यापक और पूर्ण बनाया जा सके। इसके अलावा, प्रतिक्रिया समय को कम करें, क्योंकि प्रतिक्रिया का समय जितना लंबा होता है, उतनी ही बेकाबू पक्ष प्रतिक्रियाएं होती हैं, उप-उत्पादों को अधिक जटिल। इसलिए, निम्नलिखित तीन बिंदुओं को संक्षेप में प्रस्तुत किया गया है:

माइक्रोवेव संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है: संश्लेषण प्रक्रिया में सामना किए गए कुछ अमीनो एसिड के लिए जो एकीकृत होने के लिए आसान नहीं हैं, माइक्रोवेव संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है। इस विधि के उल्लेखनीय परिणाम हैं, और प्रतिक्रिया समय को बहुत कम कर देता है, और दो प्रमुख उप-उत्पादों के गठन को कम करता है।

टुकड़ा संश्लेषण विधि का उपयोग किया जा सकता है: जब कुछ पेप्टाइड्स को सामान्य संश्लेषण विधियों द्वारा संश्लेषित किया जाना मुश्किल होता है और शुद्ध किया जाना आसान नहीं होता है, तो हम पेप्टाइड के एक निश्चित खंड में कई अमीनो एसिड के पूरे संक्षेपण को पेप्टाइड श्रृंखला में एक पूरे के रूप में अपना सकते हैं। यह विधि संश्लेषण में कई समस्याओं को भी हल कर सकती है।

Acylhydrazide संश्लेषण का उपयोग किया जा सकता है: पेप्टाइड्स का एसाइलहाइड्राजाइड संश्लेषण एन-टर्मिनल CYS पेप्टाइड और सी-टर्मिनल पॉलीपेप्टाइड हाइड्राजाइड रासायनिक चयनात्मक प्रतिक्रिया के ठोस-चरण संश्लेषण की एक विधि है जो पेप्टाइड बॉन्डिंग विधि को प्राप्त करने के लिए एमाइड बॉन्ड के गठन के बीच है। पेप्टाइड श्रृंखला में CYS की स्थिति के आधार पर, यह विधि पूरे पेप्टाइड श्रृंखला को कई अनुक्रमों में विभाजित करती है और क्रमशः उन्हें संश्लेषित करती है। अंत में, लक्ष्य पेप्टाइड तरल-चरण संक्षेपण प्रतिक्रिया के माध्यम से प्राप्त किया जाता है। यह विधि न केवल लंबे पेप्टाइड के संश्लेषण समय को कम करती है, बल्कि अंतिम उत्पाद की शुद्धता को भी बढ़ाती है।

लंबे पेप्टाइड शुद्धि

लंबे पेप्टाइड्स की विशिष्टता अनिवार्य रूप से कच्चे पेप्टाइड्स के जटिल घटकों की ओर ले जाती है। इसलिए, एचपीएलसी द्वारा लंबे पेप्टाइड्स को शुद्ध करना भी एक चुनौती है। पॉलीपेप्टाइड शुद्धि प्रक्रिया की एमाइलॉइड श्रृंखला, बहुत सारे अनुभव को अवशोषित करती है और लंबे पेप्टाइड की शुद्धि में सफलतापूर्वक उपयोग की जाती है। नए उपकरणों को अपनाकर, कई शुद्धि प्रणालियों का मिश्रण, बार -बार पृथक्करण और अन्य अनुभव विधियों को, लंबे पेप्टाइड शुद्धि की सफलता दर में बहुत सुधार हुआ।